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四川大学文章发表siRNA新方法

2018-08-08 19:12:32

四川大学文章发表siRNA新方法

生物通报道:来自四川大学华西医学中心微生物学教研室,成都生物制品研究所(Institute of Chengdu Biological Products)的研究人员通过构建质粒pAd-hTR证明了hTR siRNA在HeLa细胞系中有效和特异的端粒酶的敲除,从而指出了这种siRNA表达重组腺病毒系统在癌症基因治疗方面的前景。这一研究成果公布在《Cancer Gene Therapy》杂志上。

领导这一研究的是四川大学华西医学中心微生物学教研室主任李明远教授,其早年毕业于华西医科大学医学专业,之后在美国着名的St. Jude Children’s Research Hospital学习服装定制
,学习了基因敲除、转基因和基因沉默等现代分子生物技术。目前担任四川大学华西医学中心微生物学教研室主任,中华医学会微生物学与免疫学会第六届委员会常委,《中国病原生物学杂志》、《四川大学学报(医学版)》、《国际检验医学杂志》和《西部医学》等杂志编委,《中国普外基础与临床杂志》审稿人,国家自然科学基金同行评审专家。

原文摘要:Cancer Gene Therapy (2007) 14, 748–755; doi:10.1038/t.; published online 20 April 2007Inhibition of telomerase RNA (hTR) in cervical cancer by adenovirus-delivered siRNA[Abstract]

RNA沉默是存在于生物中的一种古老现象, 是生物抵抗异常DNA(病毒、转座因子和某些高重复的基因组序列)的保护机制, 同时在生物发育过程中扮演着基因表达调控的角色,它可以通过降解RNA、抑制翻译或修饰染色体等方式发挥作用江门市鸿杰食品有限公司

RNA沉默存在两种既有联系又有区别的途径: siRNA(small interference RNA)途径和miRNA(microRNA)途径。siRNA途径是由dsRNA(double-stranded RNA)引发的, dsRNA被一种RNaseⅢ家族的内切核酸酶(RNA- induced silencing complex, Dicer)切割成21~26 nt长的siRNA, 通过siRNA指导形成RISC蛋白复合物(RNA-induced silencing complex)降解与siRNA序列互补的mRNA而引发RNA沉默。而miRNA途径中miRNA是含量丰富的不编码小RNA(21~24个核苷酸), 由Dicer酶切割内源性表达的短发夹结构RNA(hairpin RNA, hpRNA)形成。miRNA同样可以与蛋白因子形成RISC蛋白复合物, 可以结合并切割特异的mRNA而引发RNA沉默。尽管引发沉默的来源不同, 但siRNA 和miRNA 都参与构成结构相似的RISC

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, 在作用方式上二者有很大的相似性。

由于RNAi可以作为一种简单有效的代替基因敲除的工具,在功能基因组学研究、基因治疗等领域得到了越来越多的重视。为此被Science评为2001年重要成果之一。RNAi,即引入双链RNA,通过特异性结合互补链从而抑制基因表达/引发转录后沉默。许多的研究人员开始用RNAi作为一种工具研究基因功能。较早的哺乳动物RNAi实验中,siRNAs通过化学方法合成。进一步的,开始有了商业化的体外转录方法合成siRNA的试剂盒提供,比化学合成方法经济。现在已有研究小组开发表达载体高纯度对氟
,能够在哺乳动物细胞中持续表达siRNAs。

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